Serum Levels of Infliximab and Anti-Infliximab Antibodies in Brazilian Patients with Crohn's Disease

OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the quantitative serum level of infliximab (IFX) as well as the detection of anti-infliximab antibodies (ATIs) in patients with Crohn's disease (CD). METHOD: Forty patients with CD under treatment at a tertiary center in southeastern Brazil were evaluated. Their use of infliximab was continuous and regular. We analyzed and compared the differences in the IFX and ATI levels between the patients with active CD (CDA) and those with CD in remission (CDR). RESULTS: There was no difference in the IFX level between the CDA and CDR groups (p>0.05). Eighty percent of all patients had IFX levels above the therapeutic concentration (6-10 μg/mL). Two (9%) of the 22 patients with active disease and four (22.2%) of the 18 patients in remission had undetectable levels of IFX. Four (66.6%) of the six patients with undetectable levels of IFX had positive ATI levels; three of these patients were in remission, and one had active disease. In addition, the other two patients with undetectable levels of IFX presented ATI levels close to positivity (2.7 and 2.8 AU/ml). None of the patients with therapeutic or supratherapeutic IFX levels had positive ATI levels. CONCLUSIONS: The undetectable levels of IFX correlated with the detection of ATIs, which was independent of disease activity. Immunogenicity was not the main factor for the loss of response to IFX in our study, and the majority of patients in both groups (CDA and CDR) had supratherapeutic levels of IFX.

Utilidad de la monitorización terapéutica de infliximab en el manejo de la enfermedad inflamatoria intestinal / Usefulness of therapeutic monitoring of infliximab in the treatment of inflammatory bowel disease

Background: Primary non-response and secondary loss of response (LOR) are significant problems of biological therapy for inflammatory bowel disease (IBD). Therapeutic drug monitoring (TDM) in IBD patients receiving these drugs can improve outcomes. Aim: To measure serum infliximab levels and anti-infliximab antibodies (ATI) in patients with IBD post-induction phase and during maintenance therapy assessing the clinical course of IBD. Patients and Methods: Prospective study of IBD patients receiving infliximab between July 2016-May 2017. Group-A included patients who received induction therapy while Group-B included patients who were in maintenance therapy. TDM was performed in serum samples collected at weeks-14 and 30 in Group-A and before the infliximab maintenance dose in Group-B. Clinical scores, fecal calprotectin and endoscopic score were also evaluated. Results: Of 14 patients in Group-A, 57% achieved endoscopic response. Median serum infliximab concentrations at week-14 and 30 were 2.65 AU/mL (0.23-32.58) and 2.3 AU/mL (0.3-16.8), respectively. Patients with mucosal healing had non-significantly higher median infliximab concentrations at week- 14, as compared to week 30 (median 3.2 vs 2.2 AU/ml, respectively, p 0.6). ATI >10 ug/mL were found in one and seven patients at week-14 and 30, respectively. At 52 weeks of follow-up, four patients (31%) had LOR. Group-B included 36 patients, 33% had LOR. Median serum concentrations of infliximab were 1.4 AU/mL (0.27-7.03). No significant differences in serum infliximab concentration were observed between patients in remission and those with inflammatory activity. Seventeen patients had ATI >10 ug/mL. Conclusions: Clinical algorithms using TDM might help to optimize the pharmacological therapy of IBD.

Dosagem do nível sérico do infliximabe em pacientes com doença inflamatória intestinal em remissão: uma análise comparativa de dois diferentes métodos em uma coorte multicêntrica brasileira / Serum infliximab measurement in inflammatory bowel disease patients in remission: a comparative analysis of two different methods in a multicentric brazilian cohort

ABSTRACT BACKGROUND: Infliximab (IFX) therapeutic drug monitoring is an important tool to guide therapeutic decision in inflammatory bowel disease patients. Currently, there are two methods to measure trough levels of IFX, ELISA assays or rapid tests. Despite that the ELISA assay is the most used method in therapeutic drug monitoring, the results take long to be available for clinical use, and it needs to be performed by trained personnel. In contrary, the results of a rapid test take 20 to 30 minutes to be available and can be performed by non-trained lab personnel. OBJECTIVE: The aim of the study was to compare a rapid test (QB-IFX) for quantitative determination of IFX level to one ELISA assay in a cohort of inflammatory bowel disease patients. METHODS: Cross-sectional multicentric study with 49 inflammatory bowel disease patients on maintenance therapy with IFX. Blood samples for IFX serum levels were collected immediately before infusion. IFX serum levels were classified as undetectable, low (<3.0 μg/mL), adequate (3.1-7.0 μg/mL) or high (>7.1 μg/mL). A sensitivity and specificity of each test and a comparison between tests was based on ROC curves. RESULTS: Thirty-four Crohn's disease patients and 15 ulcerative colitis patients in clinical remission were evaluated. The majority of patients had low or adequate serum levels of IFX. In relation to the serum levels proportions with the two methods, there was no significant difference (P=0.84). The ROC analysis identified a concentration threshold >2.9 μg/mL with the QB-IFX test (area under the ROC, 0.82; P<0.0001, sensitivity, 100%; specificity, 61.9%), and >3.83 μg/mL using the ELISA assay (area under the ROC, 0.96; P<0.0001, sensitivity, 100%; specificity, 92.9%). CONCLUSION: QB-IFX and ELISA assays to measure IFX levels were comparable. Both methods had accurate sensitivity and specificity to detect undetectable, low and adequate levels, but had showed low specificity for supra therapeutic levels of IFX.

RESUMO CONTEXTO: A monitorização dos níveis séricos do infliximabe (IFX) é uma importante ferramenta para guiar a tomada de decisão nos pacientes com doença inflamatória intestinal. No presente momento existem dois tipos de métodos para quantificar nível sérico de IFX disponíveis no mercado: o ELISA e o teste rápido. O método ELISA é o mais usado em todo o mundo, todavia os resultados demoram de 1 a 2 dias para estar disponíveis para uso clínico. Além disso, o ELISA é um método que requer um técnico especializado para realizá-lo. Ao contrário, os resultados do teste rápido estão disponíveis em 20 a 30 minutos e esse pode ser realizado por um funcionário não especializado. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi comparar o teste rápido (QB-IFX) com o teste ELISA para determinação quantitativa do nível sérico de IFX em uma coorte de pacientes com doença inflamatória intestinal. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal multicêntrico com inclusão de 49 pacientes em terapia de manutenção com IFX. Amostra sanguínea para dosagem sérica do IFX foi coletada imediatamente antes da infusão. A dosagem sérica do IFX foi classificada em indetectável, baixo (<3,0 μg/mL), adequado (3,1-7,0 μg/mL) ou alto (>7,1 μg/mL). A sensibilidade e a especificidade de cada teste e a comparação entre os testes foram avaliados através de curva ROC. RESULTADOS: Foram avaliados 34 pacientes com doença de Crohn e 15 pacientes com retocolite ulcerativa em remissão clínica da doença. A maioria dos pacientes apresentou níveis baixos ou adequados do IFX sérico de acordo com ambos os métodos de dosagem. Não houve diferença significativa entre os métodos quando avaliados categoricamente (P=0,84). A análise da curva ROC identificou limites de concentrações >2,9 μg/mL com o teste rápido QB-IFX (AUC ROC, 0,82; P<0,0001, sensibilidade: 100%; especificidade: 61.9%), e >3,83 μg/mL usando o método ELISA (AUC ROC, 0,96; P<0,0001, sensibilidade: 100%; especificidade: 92,9%). CONCLUSÃO: Os testes QB-IFX e ELISA foram comparáveis para dosagem do nível sérico de IFX. Ambos os métodos são acurados e apresentaram boa sensibilidade e especificidade para detecção de níveis indetectáveis, níveis baixos e níveis adequados, porém mostraram pouca especificidade para níveis supra terapêuticos da droga.

Importância da medida dos níveis de infliximabe em pacientes com doença inflamatória intestinal: uma coorte Brasileira / Importance of measuring levels of infliximab in patients treating inflammatory bowel disease in a brazilian cohort

ABSTRACT BACKGROUND: Crohn's disease and ulcerative colitis are chronic inflammatory bowel diseases. In such pathologies, there is an increased production of alpha tumor necrosis factor (TNF-α). Patients, in whom the conventional immunosuppressant treatment fails, require the use of immunobiological therapy, such as anti-TNF-α, a monoclonal antibody. Infliximab is an anti-TNF-α drug, a chimerical immunoglobulin, with a murine component, which is responsible for the generation of immunogenicity against the drug and formation of anti-TNF-α antibodies. The presence of anti-drug antibodies may be responsible for adverse events and reduction of the drug's effectiveness. Patients with inflammatory bowel diseases undergoing therapy with biological medication, such as infliximab, can relapse overtime and this may not be translated into clinical symptoms. Thus, there is a need for a method to evaluate the efficacy of the drug, through the measurement of serum infliximab levels, as well as antibodies research. OBJECTIVE: This study aimed to measure serum infliximab levels and anti-infliximab antibodies in patients with inflammatory bowel diseases post-induction phase and during maintenance therapy, and describe the therapeutic modifications that took place based on the serum levels results. METHODS: It was a retrospective study, that included forty-five patients, with a total of 63 samples of infliximab measurement. RESULTS: Twenty-one patients had an adequate infliximab serum level, 31 had subtherapeutic levels and 11 had supratherapeutic levels. Seven patients had their medication suspended due to therapeutic failure or high levels of antibodies to infliximab. CONCLUSION: In conclusion, only a third of the patients had adequate infliximab levels and 36% presented with subtherapeutic levels at the end of the induction phase. Therapy optimization occurred based in about 46% of the samples results, demonstrating the importance of having this tool to help the clinical handling of patients with inflammatory bowel diseases ongoing biologic therapy.

RESUMO CONTEÚDO: Doença de Crohn e retocolite ulcerativa são doenças inflamatórias intestinais crônicas. Nelas, ocorre aumento da produção de fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Pacientes que falham no tratamento convencional imunossupressor, requerem uso de terapia imunobio­lógica, que são anticorpos monoclonais, principalmente os anti-TNF-α. O infliximabe é uma droga anti-TNF-α, uma imunoglobulina quimérica, com componente murino. Este é responsável pela imunogenicidade da droga e a formação de anticorpos. Presença de anticorpos antidroga pode ser responsável pelos eventos adversos e redução da eficácia da droga. Pacientes com doenças inflamatórias intestinais, em terapia imunossupressora com medicação biológica como o infliximabe, podem ter recaída da doença e muitas vezes isso não se relaciona com a sintomatologia do paciente. Por isso há a necessidade de um método de avaliação do efeito da droga como a dosagem do nivel sérico do infliximabe, bem como da pesquisa de anticorpos. OBJETIVO: O estudo tem como objetivo conhecer os níveis séricos do infliximabe e dos anticorpos anti-infliximabe em pacientes com doença inflamatória intestinal em terapia de manutenção ou pós-indução e descrever as condutas terapêuticas que foram modificadas em função dos níveis séricos de infliximabe e anticorpos para infliximabe. MÉTODOS: Trata-se de estudo restrospectivo, com análise da dosagem dos níveis séricos de infliximabe e anticorpos para Infliximabe. Foram incluídos 45 pacientes, num total de 63 coletas de dosagem de infliximabe. RESULTADOS: Vinte e um paciente estavam com o nível sérico de infliximabe adequado, níveis subterapêuticos em 31 pacientes e níveis supraterapêuticos em 11 pacientes. Sete pacientes tiveram a medicação suspensa por falha terapêutica ou altos níveis de anticorpos para infliximabe. CONCLUSÃO: Apenas um terço dos pacientes apresentavam níveis adequados de infliximabe e 36% dos pacientes apresentavam níveis subterapêuticos ao término da indução. Em cerca de 46% das amostras a conduta adotada se baseou nos níveis de infliximabe e anticorpos para infliximabe demonstrando a importância de se ter esta ferramenta para auxílio no manejo clínico dos pacientes portadores de doenças inflamatórias intestinais em terapia biológica.

Determinaçäo sérica dos ácidos biliares na detecçäo da hepatopatia crônica e no seu estadiamento funcional / Serum determination of bile acids in the diagnosis of chronic liver disease and in the functional staging

Os valores séricos dos ácidos biliares totais foram dosados através de método enzimático-colorimétrico em 15 indivíduos dispépticos, sem doenças hepática (grupo controle) e em 52 portadores de hepatopatia crônica de etiologia alcoólica, subdivididos de acordo com a classificaçao funcional de Child-Pugh (Child A=17; B= 18 e C = 17) ou de acordo com o exame clínico em grupos compensado (n = 22) e descompensado (n = 30). A dosagem sérica dos ácidos biliares, particularmente as pós-prandiais, apresentaram elevado poder discriminativo na detecçao de hepatopatia crônica, separando o grupo controle de qualquer un dos grupos de etilistas portadores de hepatopatia crônica. Apresentaram também correlaçao significante com os testes bioquímicos mais diretamente relacionados à funçao hepatocelular, como albumina, bilirrubina total e atividade de protrombina, além da classificaçao de Child-Pugh numérica. No entanto, quando os pcientes cirróticos foram separados de acordo com a apresentaçao clínica, a dosagem plasmática dos ácidos biliares apresentou capacidade discriminativa inferior aos exames convencionais como a classificaçao de Child-Pugh numérica e o tempo de protrombina, demonstrando ter valor limitado na avaliaçao funcional e no acompanhamento evolutivo da hepatopatia crônica alcoólica.